实验步骤
1、实验之前,一定要确保高架十字迷宫整个装置的清洁。这个步骤不仅仅是要求当天的实验,更加侧重于每一次动物实验完成后的清洁除味工作,一定要去除上一只动物在宫体内遗留下来的尿液、粪便等,尽可能创造一个清洁、无味道的理想试验环境。同时,实验员需要记录动物的编号、日期、状态等信息;实验动物提前运送到行为学实验室临时笼架 ,
适应环境至少3H左右, 减少动物紧张。
2、将实验动物(大鼠或者小鼠)从饲养笼中取出,实验动物尽量背向实验员,将动物轻轻放在仪器宫体的中央区域,动物面向开臂,然后实验员迅速安静的离开;
3、打开SuperMaze或者VisuTrack动物行为分析软件,跟踪动物在高架十字迷宫仪器内的轨迹运动,自动计算指标,通常实验时长为5min;
4、实验结束后,取出实验动物,放入饲养笼,做好实验完成动物的标记信息,同时,用酒精和纸巾清洁迷宫。
脓毒症动物模型构建方法总结脓毒症:
是一种严重的全身性炎zheng反应综合征,是由感ran引起的机体免yi系统过度ji活和炎zheng反应失控的疾病。免yi系统反应过于激烈,导致炎zheng反应泛滥,从而引发全身性炎zheng反应综合征。
常见脓毒症造模方法:
1.细菌感ran:通过注射细菌或其产生的细菌毒su来诱导脓毒症模型。常用的细菌包括大肠杆jun、金黄色葡萄球jun、肺yan克雷伯菌等。
2.LPS诱导:脂多糖(LPS)是细菌外膜中的主要成分,具有强烈的mian疫ji活作用。可以通过注射LPS来诱导炎zheng反应和脓毒症模型。常用的给药途径包括静脉注射、腹腔注射或气道暴露。
敲低效果验证方法:
RT-PCR
检测mRNA,是否仍存在靶 mRNA?或是否敲低成功?
这种方法非常灵敏,但无法准确预测蛋白质水平。
蛋白质印迹实验
使用抗ti来检测样品中的靶蛋白表达以及多种相关蛋白质表达,从而观察靶蛋白敲除对其它蛋白质的影响。
免yi细胞化学法
可检测是否存在敲低蛋白。
其优势在于利用双重染色法,可同时检查敲除对其它蛋白质表达的影响以及其它蛋白质在细胞中的位置。
药xiao学实验-减肥功能的动物试验评价方法
1 测试项目
1.1 原理
这种方法是用高热量食物诱导动物肥胖,然后给试验样品(肥胖模型),或者同时给高热量食物给试验样品(肥胖预防模型),观察其变化动物体重和体脂含量。
1.2 肥胖模型法
SPF级雄性大鼠,体重180-220g,8-12只/组。在屏障系统下,给大鼠喂养维持饲料并观察5-7天。按体重随机分为两组,10只给予维持饲料作为空白对照组,60只给予高热量模型饲料。每周记录喂食量、洒食量、剩食量,称体重1次。喂养2周后,将给予高热量饲料的60只大鼠按体重增加进行排序,剔除1/3体重增加较低的抗肥胖大鼠。选取40只肥胖敏感大鼠给予高热量饲料6周,空白对照组同时给予维持饲料。