因 SP 是单只大鼠进行实验且在实验中大鼠的活动空间受限,故有学者认为以上的临床与实验室表现可能与大鼠的群体隔离或活动空间受限有关,进一步研究发现,在实验前群体饲养的动物当与群体隔离后也会出现攻击行为增加,血浆中 CORT 增加,功能抑制等表现。大鼠活动空间受限也可引起血浆中 CORT 的水平的增加,这些结果与单平台睡眠剥夺实验中见到的类似,为克服SP 中大鼠与群体分离及活动空间受限的缺点,在 SP 基础上进一步发展为多平台睡眠剥夺法。
1.2多平台睡眠剥夺法
M P法于1981年先应用在大鼠睡眠剥夺实验中,在 M P中为扩展大鼠的活动空间将台由 SP 中的 1 个增加至 7 个,仍将1只大鼠放在台间进行睡眠剥夺试验,因大鼠可以在 7个台间自由活动,故活动范围较 SP 中有明显增大。经实验比较,在M P中反映应激增强的一些指标,如上腺重量增加和胸腺重量减少仍然存在,甚至在大鼠血液中 ACTH %CORT 的增加及上腺重量的增加较SP的更高,提示 M P较SP有更强的应激性!考虑到大鼠为群居动物,单只大鼠实验易导致与所在群体的隔离。为克服群体隔离所带来的应激反应,有学者将 M P 法进一步改良发展为改良多平台睡眠剥夺法!
什么是siRNA ?
小干扰 RNA (siRNA) 是由 20-25 个核苷酸组成的双链 RNA 分子,在细胞中具有多种功能。在 RNA 干扰 (RNAi) 通路中,siRNA 通过与互补 mRNA 分子杂交干扰基因表达。这种干扰会触发 mRNA 降解,进而抑制特定基因的基因表达。
siRNA 于 1999 年由 David Baulcomb 实验室shou次发现。2001 年,Thomas Tuschl 提出合成 siRNA 会在哺乳动物细胞中诱导 RNA 干扰 (RNAi)。如今,专门设计用于与 RNA 靶序列杂交并使其降解的“合成”siRNA 寡核苷酸已被广泛用于诱导细胞 RNAi。靶 mRNA 的降解能够有效“敲除”相应蛋白质的表达。然后可研究分析靶蛋白浓度降低造成的影响。高血zhi症模型建立随着人们饮食结构的改变,高脂血症的发病率呈上升趋势,长时间的高血zhi可引起机体代谢紊乱,产生动mai硬化,进而引起心、脑、shen等重要qi官受损,严重危害健康,甚至危及生命。流行病学研究显示,高脂血症是导致动mai粥样硬化和糖niao病的主要病因,而制备一个理想的高血zhi动物模型是研究血zhi代谢及其影响因素的关键。一.实验材料:
C57小鼠(6周)
高脂饲料(协同饲料)
二.实验步骤:
动物适应性饲养一周后喂食60%高脂饲料,持续12周。