灌注固定主要用于神经系统,其他组织意义不是很大,而且耗时耗力。对神经系统防止变性效果较好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠时一般采用输液器的针头 (4 号半,这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白,针头要从心轴方向进针,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,开始灌流后剪破右心耳,约 40 毫升生理盐水,后再灌流约 20 毫升多聚甲醛,整个灌流固定的过程就完成了。
灌注固定主要用于神经系统,其他组织意义不是很大,而且耗时耗力。对神经系统防止变性效果较好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠时一般采用输液器的针头 (4 号半,这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白,针头要从心轴方向进针,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,开始灌流后剪破右心耳,约 40 毫升生理盐水,后再灌流约 20 毫升多聚甲醛,整个灌流固定的过程就完成了。
siRNA 的作用原理
利用短寡核苷酸 siRNA 或能够转录 siRNA 的 DNA 质粒将双链 RNA (dsRNA) 引入细胞。细胞中的 Dicer 蛋白将 dsRNA 消化为 21 bp 的 dsRNA (siRNA)。 siRNA 被整合到 RNA 诱导沉默复合体 (RISC) 中。在 RISC 复合体中,dsRNA 发生链分离。其反义链与细胞中的互补/靶 mRNA 杂交。活化 RISC 中的核酸酶降解靶 mRNA。断裂的 mRNA 无法翻译成蛋白质。也就是说蛋白质无法表达,从而成功“敲除”蛋白质。
大鼠模型的构建
:
(英语:Uremia)指衰竭使蛋白质消化后产物、尿素等身体废弃物无法排出,滞留体内产生的现象。
病因可归为三方面
1.前性因子:如心脏衰竭,血管内水份容积不足等因素造成。
2.性因子:如:毒物质造成细胞坏死或纤维化,丝球,或有一些全身性造成硬化或变。另外,全身性的血管炎有时也会丝球,造成丝球发炎,引发。
3.后性因子:泌阻塞。可能原因为或泌等因素造成。
实验材料
戊钠
SD大鼠
造模方法
1、适应性喂养7d后,戊钠(30mg/kg)腹腔注射大鼠,保定消毒, 在左侧位置,做长约1.5cm切口,逐层切开皮肤、筋膜及肌层,暴露左,分离周脂肪组织,用带针丝线结扎上1/3后切除, 棉球压迫止血。
2、同法切除下1/3,无出血后复原剩余左,缝合肌层与皮肤,术后腹腔注射青。
3、恢复饲养1w后进行右切除术。戊钠(30mg/kg)腹腔注射大鼠,暴露右并分离出蒂后,直接结扎蒂,切除右,检查结扎处无出血后缝合肌层与皮肤,术后腹腔注射青。
实验案例
大鼠造模后7d取尾血测肌酐值, 以达到正常血肌酐值2~3倍者为大鼠
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